学习目标
(1)了解培养基中各成分的作用。
(2)了解培养基母液的作用,明确母液配制的目的和意义
(3)能按照配方独立进行各类培养基母液的配制与保存。
任务要求
由教师提出任务,师生共同探究培养基配方各类成分的特点以及作用,然后根据生产实际制订培养基母液配制计划,并在教师指导下各小组分工来完成各种母液的配制任务。
一、任务提出
(常用的培养基有哪些?
(2)一个完善的培养基配方的成分有哪些?各有何作用?
(3)各种成分如何添加到培养基中?
(4)为什么要配制母液?
(5)各种母液是如何配制的?
二 、任务分析
植物组织培养所选用的培养基有几十种,而每种又包括多种成分,可以根据不同的需要来选择不同的培养基。在这些培养基中有些成分的用量非常微小,如果每次配制培养基时都即时称量,不仅费时费工,也不够准确,因此可以根据配方特点预先配制成母液.每液在配制的过程中,可以根据每种元素的化学性质、用量等来进行区分,配制成不同的母液:
三、相关知识
在植物组织培养过程中,培养基的配制是一项最基本的工作。配制每种培养基需要十丿L种化合物,配制起来十分不方便,特别是微量元素和梢物生长激素的用量极少,很难达到精确称量·因此,可将配方中的各种元素按照一定的方式,配成一些浓缩液,用时稀释,这种浓缩液就是浓缩储备液(简称母液母液不仅可以解决上述问题,而且还可以减少工作量,使用起来非常方便,提高了工作效率,同时也提高了实验的精度·
(一)各种母液的配制
1,MS培养基母液的配制
在配置母液过程中,应先用量量取700~800mL的蒸慵水,放人1000mL的容量瓶中,然后分别称取每种药品,分别溶解。大量元素在配制的过程,要注意一定要按照表3.·1给定的排列顺序依次混合定容,以免发生沉淀·铁盐母液在配制过程中,要把硫酸&h(FeSO.·7H区))和乙二胺四乙酸二钠(Na疒EDTA)分别溶解·然后将乙二胺四乙酸、钠溶液缓慢倒人硫酸亚铁(FeS()4·7H》0)溶液中,加热溶解10min左右,通过加热形成稳定的螯合铁,性质比较0定,不易产生沉淀.在配制微量元素母液和有机物母液时也应分别称重和溶解,对顺序要求不是很严格,一般不会出现沉淀现象·