1.无菌体系的建立

　　

　　1）外植物的选取、灭菌和接种

　　

　　选择适宜当地栽培的高产优质或用途特殊的甘薯品种植物作为母株，取枝条，剪去叶片后切成数段。每段带一个腋芽，含顶芽的2-3节。

　　

　　剪好的茎段流水数分钟后。用滤纸吸干表面水分后70%酒精中浸泡10s，在用0.1%升汞溶液消毒10min，用无菌水冲洗5次；或用10%次氯酸钠溶液消毒15min，用无菌水冲洗3次。

　　

　　把消毒好的芽放在立体显微镜下，无菌削去丁芽和腋芽上较大的幼叶，切去0.3-0．5mm含1～2个叶原基的茎尖组织，接种在培养基上。

　　

　　2）培养基及培养条件

　　

　　甘薯茎尖培养较理想的培养基为MS+IAA0，1一0，2mg/L+6-BA0．1一0．2mg/L+3％蔗糖，pH值为5．8～6，0。若添加GA3().05mg/L，对茎尖的生长和成苗会有更好的促进作用。培养条件以温度25～28℃，光照强度巧00、2000lx，光照14h/d为宜。

　　

　　2，初代培养

　　

　　不同品种的茎尖生长情况有差异。一般培养10d茎尖膨大并转绿，培养20d左右茎尖形成2～3mm的小芽点，且在基部逐渐形成绿色愈伤组织。此时应将培养物转人无激素的MS培养基上，以阻止愈伤组织的继续生长，使小芽生长和生根。芽点基部少量的愈伤组织对茎尖生长成苗有促进作用，但愈伤组织的过度生长对成苗则非常不利，且有明显的抑制作用。

　　

　　3．初级快速繁殖

　　

　　当薯苗长至3～6cm高时，将小植株切段进行短枝扦插，除顶芽一般带有]、2片展开叶片外，其余的切段都是具一节一叶的短枝·切段直插于三角瓶内无植物生长物质的MS培养基中，培养条件同茎尖培养。2～3d内，切段基部即产生不定根，30d后长成具有6、8片展开叶的试管。

　　

　　4．脱毒苗快速繁殖

　　

　　试管苗经严格检测确认为脱毒苗后，可进行试管切段快速繁殖。试管繁殖脱毒苗一般30、40d为一个繁殖周期，一个腋芽可长出5片以上的叶，繁殖系数约为5。为降低人工培养的成本，可用食用白糖代替蔗糖；将培养基中的大量元素减半，甚至用I/4MS（大量元素）培养基；尽可能利用自然光照培养；也可用经检验合格的自来水代替蒸馏水或无离子水。

　　

　　5@试管苗驯化栽

　　

　　l)试管苗驯化移栽

　　

　　取株高达到3～5cm的健壮苗，将瓶塞打开，置室温和自然光照下锻炼2～3d，使幼苗逐渐适应外界环境条件。移栽时倒人一定量的清水，振摇后松动培养基，小心取出幼苗，洗去根部的培养基以防杂菌滋生，再移至灭菌的蛭石或沙性土壤中。待苗生根、长出新叶后再移植于土壤中，有利于苗的快速生长·

　　

　　2）试管苗驯化移栽管理

　　

　　基质温度是根系成活的关键，但不宜过湿·应维持良好的通气条件，促使根生长。空气也应保持湿润，以防试管苗失水枯死·移栽初期，可用塑料薄膜覆盖·温度以25～30℃为宜，并注意遮阳，避免日晒·脱毒苗繁育虽在防虫网内进行，但有时会因封闭不严或土内自生性出蚜，而导致网内有蚜虫等现象发生，或者出现地下害虫危害。为此，应定期喷洒农药，防治病虫害。

　　

　　6．适时定植

　　

　　蛭石缺乏植物生长必需的营养，故当薯苗成活后，应及时植于防虫网内已消毒的土壤中，促使其生长·为提高网室利用率，定植的薯苗应适当密植·采取剪秧打插、以苗繁苗的方式，可在短期内得到数量巨大的脱毒苗。在北方，为克服冬、春温度过低的影响，可建立防虫温室，并辅以取暖升温措施，保证脱毒全年进行繁育。以此法繁育的薯苗在防虫网内所结薯块即为原原种薯。