一、植物组织培养实验室的设置

　　

　　植物组织培养实验室与其他实验室的主要区别是要求无菌操作，避免微生物及其他有害因素的影响。植物组织培养实验室的面积大小和装备取决于两个因素：一是实验性质和研究内容，二是能承受的经费能力。然而，一个标准的植物组织培养实验室必须具备下列条件：①清洗和储存玻璃器皿、塑料器皿和其他实验器皿；②培养基的配制、灭菌和储存；③植物材料的无菌操作；④可控温度、光照、湿度等条件，以便对材料进行体外培养；⑤培养物生长发育过程的显微观察。因此，植物组织培养实验室至少需要有三间相连但相互隔开的房间：间用于玻璃器皿的清洗和储存，以及培养基的制备(称为培养基室)；第二间用于无菌操作(称为接种室)；第三间用于放置培养物(称为培养室)。此外，如果条件许可，应配备能进行组织和细胞生长显微观察的细胞学实验室。

　　

　　(一)培养基室

　　

　　培养基室的清洗区应备有各种类型的毛刷、大水槽和冷热水源。此外，还应备有塑料桶，用以浸泡需要清洗的实验室器皿；鼓风干燥箱，用以干燥清洗后的器皿；防尘厨，用以储存干净的器皿。条件允许的话，清洗区应单独设一个房间。如果培养基的制备和器皿的清洗在同一个房间内进行，应特别注意不要使清洗干扰培养基的制备，严格防止肥皂水等溅入培养基内。可以在清洗区与培养基制备区之间临时加一块挡板，或把清洗时间和配制培养基时间错开。

　　

　　配制培养基所需的一般设备包括以下几种。①工作台：工作台的高度应适合于操作人员工作，要求表面平整、耐高温、放置水平。②低温冰箱：用以储存长期保存的药品。③普通冰箱：用以储存各种化学药品、植物材料和短期储存储备液及母液等。④大塑料瓶：用以储存蒸馏水。⑤天平：用于称量。⑥电热磁力搅拌器：用以溶解化学药品。⑦电炉：用于加热溶化琼脂和手提式高压灭菌锅的加热。⑧酸度计或pH试纸。⑨抽气机或真空泵：用以辅助过滤灭菌。⑩恒温水浴：用于融化琼脂。⑩高压灭菌锅：用以进行培养基灭菌。⑩其他用具。

　　

　　(二)接种室

　　

　　接种室也称为无菌操作室，好能与外界隔离，不能穿行或不受其他干扰。接种室分更衣间、缓冲间及操作间三部分。更衣间供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩之用。缓冲间位于更衣间与操作间之间，目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温箱及某些小型仪器。操作间则用于无菌操作，其大小要适当，且其顶部不宜过高以保证紫外线的灭菌效果，墙壁光滑无死角以便清洗和消毒。接种室为密闭式，用紫外线灭菌灯进行空气消毒。有些实验室使用电子消毒灭菌器，它在高压电场作用下，电子管的内外电极发生强烈电子轰击，使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧是一种强氧化剂，能与细菌的胞膜及酶蛋白进行氧化分解反应，因此靠臭氧气体弥漫性扩散达到杀菌的目的，使消毒时没有死角。消毒后空间内的残留臭氧只需30～40min即能自行还原成氧气，对空间不留异味、消毒物体表面不留残毒。

　　

　　接种室的主要仪器设备是超净工作台。超净工作台可直接购买，安装方便，占用空间小且净化效果很好，为植物组织培养工作提供了良好的无菌操作环境。

　　

　　(三)培养室

　　

　　培养室的温度必须是可控的，一般是用空调或热风机使温度保持在(25±12)℃。若要求更高或更低的温度，可使用装有荧光灯的培养箱。培养箱可安装在培养室之外任何方便和安全的地方。

　　

　　植物组织培养要求一定的光照，采用日光灯源，一般光照强度为1000～30001x。但有些实验需要在散射光下进行，有些则要求完全黑暗条件。因此，在设备上对此应有所准备。光源可由自动定时开关控制。暗培养一般是在特制的木橱内进行或加盖黑布。

　　

　　培养室的湿度应控制在相对湿度80％左右，当培养室的相对湿度降低到50％以下时，应采取措施增加湿度，以免培养基变干。如果湿度太高则应除湿，以免培养瓶盖塞发潮，增加污染的机会。

　　

　　在培养室内应设有若干培养架以放置培养物。培养架大小一般为1200mm×600mm×400mm，层数根据培养室的空间高度而定，每层培养架装上玻璃板。但玻璃板下面的日光灯在工作时易使玻璃发热，使放置其上的培养瓶及培养基的温度增加，影响培养效果。安装刚硬的铁丝网或细钢管，在其上放筛孔塑料盘，以便空气流动和稳定温度，同时也可使顶层的灯光能透射到下层的培养物上。培养架可以木制也可以钢制，每层分别装有日光灯管。灯管和上一层架子之间装有隔热层，以免上层培养物的底部受热。

　　

　　三角瓶、玻璃罐或培养皿都可直接置于培养架上，或先置于大小合适的盘子上。再将盘子置于培养架上。所用的容器若为试管，就需要有试管架。试管架可用铁丝制作，每个试管架能装25个或50个试管。培养容器必须粘上标签或用记号笔标注，注明详细的实验细节(植物名称、外植体、培养基、培养时间等)。

　　

　　培养室内应设有摇床，以便进行液体悬浮培养。摇床可以是平动式的，也可以是旋转式的。应选购温光可控式摇床。