降低组培污染率是确保组培繁苗成功与否的关键，常用的技术措施如下。

　　接种室消毒每天接种前用紫外线灯照射半小时，每周用臭氧发生器消毒灭菌1次，消毒时间半小时。

　　培养瓶灭菌将装好培养基的培养瓶放入高压灭 菌锅中，进行高温灭菌半小时，杀灭培养瓶中真菌和细菌。

　　1.组培污染控制

　　1.外植体的处理：尽可能减少新鲜外植体材料切割、接种操作过程中在空气中暴露的时间, 以减轻外植体的褐化。 

　　2.降低环境的pH: 多酚氧化酶的活性在pH 6.5时大,随着pH的降低活性下降。在培养基中适量加入维生素C或柠檬酸等还原剂,也能降低pH,但不能低于5.5,因为培养基在pH 5.2～5.8范围内兰花都能正常生长,以pH 5.5为宜, 所以加入还原剂在降低pH的同时, 也能降低多酚氧化酶的活性, 从而减轻材料的褐化。

　　3.使用适当的外植体消毒剂种类、浓度和处理时间:用消毒剂有氯化汞和次氯酸钠,但氯化汞易引起褐化,次氯酸钠次之,其浓度与褐化程度呈正相关处理时间越长,消毒效果越好,但褐化也越严重,因而要正确选择消毒剂浓度及消毒时间,才能保证较高的外植体存活率。

　　2.黄化苗的问题

　　1.发生原因:引起黄化的主要原因是培养基中Fe含量不足,各种矿物质营养不均衡,培养环境通气不良,瓶内乙烯含量增高,激素配比不当,糖用量不足或长时间不转移,培养基内的糖已耗尽,pH变化过大,培养温度不适时高时低,光照不足, 材料污染 特别是被细菌污染等。

　　2.解决方法：首先检查母液配制是否正确,及时转接培养物材料,降低密度,使用透气的棉花塞或透气的封口纸或膜 来改善瓶内通气状况,去除污染,控制培养温度,适当增加光照,适当调节pH、激素配比和无机盐浓度。另外,在培养基中加有抗生素的兰花组培苗有时也会出现幼苗黄化现象,如果黄化严重,应适当减少用量或停止使用。

　　3.污染问题

　　1.主要原因：生物、细菌、霉菌、病毒污染是组培工作中棘手的问题。在组培过程中,细菌污染率高于霉菌污染率,占总污染率80%以上。细菌污染又分为外生细菌、内生细菌的污染, 外生细菌污染多数是培养基、外植体接种、母瓶材料、接种工具、接种员工违反操作规程而引起,而内生细菌污染情况比较复杂,可能是外植体材料本身携带,所以选择适宜的外植体材料常常是生产兰花组培苗成败的关键。

　　4.解决方法

　　1.1期对培养器皿和接种工具进行高压灭菌消毒：消毒出锅后的接种纸好放入烘箱烘干水分后2d 用完,刀、剪、镊子等金属用具,每次操作在接种开始前需要在95%酒精中浸泡5～ 10 m in在酒精灯的火焰上灼烧消毒,冷却后使用。在接种期间避免交叉污染