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草莓脱毒种苗两段繁育技术

  草莓在长期的无性繁殖过程中,自身会感染和积累各种病毒,非常会引发草莓病毒,轻者植株生长势减弱,果实变小,产量降低;重者会出现叶片皱缩、植株矮小、果实奇形,品质低劣、产量下降,给种植户带来严重的经济损失。目前还没有有效的药剂防治病毒病。茎尖脱毒、原原种苗在组培室进行,原原种苗的驯化在驯化温室进行,繁殖原种苗、良种苗在生产基地进行。整个过程划分两段:原原种苗——原原种苗的驯化在巫溪县脱毒组培中心进行,原种苗、良种苗繁殖在高山露地良种苗圃进行。

  1 组培室茎尖脱毒

  1.1 配制培养基

  初代培养基以MS培养基成分为基础,添加细胞分裂素每升1.0mg,吲哚丁酸每升0.1~0.2mg,赤霉素每升0.1~0.2mg,蔗糖每升30g,琼酯每升5~7g。

  大量无素:硝酸铵1650mg,硝酸钾1900mg,磷酸二氢钾170mg,氯化钙440mg,硫酸镁370mg,硫酸锰223mg,硫酸锌8.6mg,硼酸6.2mg。

  微量元素:碘化钾0.83mg,硫酸铜0.025mg,氯化钴0.025mg,钼酸钠0.25mg。

  铁盐:乙二铵四乙酸二钠37.3mg,硫酸亚铁27.8mg,肌醇100mg,甘氨酸2mg。

  有机成分:盐酸吡哚醇0.5mg,盐酸磺胺素0.1mg,烟酸0.5mg,蔗糖342.31mg。

  PH:6.6~7.0

  1.2 选取茎尖,茎尖处理,茎尖接种

  应在长势良好,没有病虫害的生产田进行,不适宜选择种苗田,选择匍匐茎长的茎尖,选取时间应在匍匐茎旺盛生长期。选择方法:先进行株选,选择植株健壮苗,结果多,果形大,并具有品种典型性状的植株,再匍匐茎长势进行选择,茎尖叶片完全没有展开的匍匐茎,茎粗2~4mm,选好的匍匐茎指前端4~5cm的芽段,先用洗洁精进行冲洗,用自来水反复冲洗干净,接种前先将室内紫外杀灯打开,同时将超净工作台紫外杀菌灯打开,杀菌30~40min,空间消毒,操作人员用75%的消毒酒精棉对操作台面全面消毒。将洗净的茎尖倒入瓶中,加75%的酒精浸泡杀菌2~3min,再用0.1%升汞溶液浸泡5~10min,将升汞溶液倒出后,用无菌水反复冲洗3~5次,再用无菌水浸泡5min,将水倒出,用镊子将酒精棉夹起点着,快速擦洗所有的器具,杀菌消毒,并将周围的工作台面彻底消毒杀菌,为了消毒彻底,要反复多擦洗几遍,最后将镊子和解剖刀,在酒精灯上火烧消毒。紧接着,用镊子取出茎尖,剥去外面的包叶,露出生长点时,用解剖刀的尖部,将大小在0.2~0.3mm剥茎尖生长点剥出,迅速置入瓶中的培养基上,每个瓶中可以接种4~5茎尖,马上将瓶封上,写上品种和接种日期,培养室内温度20~25℃,光照2000~3000个勒克斯,初代培养诱导茎尖形成预伤组织,并分化长出茎叶,每天保证光照14~16h,前20~30d,茎尖产生预伤组织,开始分化新芽,以后新芽不断增加,形成小芽丛,经过30d的生长,芽丛长出茎叶,长成茂密的叶丛。初代培养中就是要解决杂菌污染问题,要及时将杂菌污染的瓶检出。

  1.3 继代培养

  初代苗只有茎叶,没有根。一般情况下,初代苗长到3~5cm时,就可以转瓶,专瓶后的培养就叫继代培养,也叫增殖培养,主要是为了扩繁初代苗,继代培养殖需要更换培养基,在MS培养基的基础上,附加细胞分裂素0.3~0.5mg/L,吲哚丁酸0.1mg/L,赤霉素0.1mg/L,蔗糖30g/L,琼酯5~7g/L。细胞分裂素主要促进形成愈伤组织和芽,吲哚丁酸主要是促进形成根,赤霉素主要是促进形成茎叶,继代转瓶接种时,消毒方法同茎尖接种。打开培养瓶用镊子将脱毒苗轻轻夹出,用剪刀将小苗叶片剪掉,只留0.5cm长的叶柄,将单株分开,将叶柄朝上放到继代培养基上,每瓶放4~5个,将瓶口封住,放到培养室中,光照温度同初代培养。在继代培养过程中,茎基部不断分生,最后形成4~6个小芽丛,长成4~6个小苗,经过20~30d培养,当小苗长到3~5cm时,又可以再进行转瓶增殖,以后每20~30d可以转瓶一次,一般可以转接4~5次,每转接一次,小苗的数量榀以增加4~6倍,继代培养的苗叫继代苗,一般没有根,紧接着要进行生根培养,促进继代苗萌发出根系,长出根茎叶都暗有的完整苗。这一环节需要更换培养基,在MS培养基的基础上,要添加吲哚丁酸0.2~0.3mg/L,蔗糖15~20mg/L,琼酯5~7g/L,温度光照和管理同前面初代培养,多数品种经过15~20d,就可以生出4~5条新根,生根率可以达到100%,这时原原种苗就培育好了。

 来源:网络
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